Skip to content

Białko X wirusa zapalenia wątroby B promuje inwazję komórek nowotworowych poprzez indukowanie ekspresji metaloproteinazy-1 w postaci błonowej i ekspresji cyklooksygenazy-2 ad 6

1 miesiąc ago

749 words

Ilość lucyferazy analizowano 18 godzin później, a wyniki wyrażono jako indukcję składania ponad wartość bez pSV-X. (b) Komórki wątroby Chang transfekowano jak w plazmidach reporterowych zawierających różne delecje i mutacje punktowe promotora COX-2, razem z 5 .g pSV-X lub pSV-hygro. Wyniki są wyrażone jako krotność indukcji względem wartości bez pSV-X dla każdego konstruktu promotora i są reprezentatywne dla czterech niezależnych eksperymentów. (c) Komórki wątrobowe Chang transfekowano jak za pomocą 5 .g pSV-X lub pSV-hygro i .g dominującego negatywnego wektora ekspresyjnego NF-AT pSH102C4 418, NF-AT2 typu dzikiego (NF- ATwt) wektor ekspresyjny lub pusty wektor pBJ5 jako kontrola ujemna. Wartości wyrażono jako indukcję krotności względem wartości za pomocą pBJ5 i bez pSV-X. Wyniki są reprezentatywne dla co najmniej trzech niezależnych eksperymentów. W celu dalszego wykazania udziału NF-AT w pośredniczonej przez HBx transaktywacji promotora COX-2, dodaliśmy dominujący negatywny wektor ekspresyjny NF-AT do systemu transfekcji, co spowodowało 50% zahamowanie promotora COX-2. aktywacja przez HBx (Figura 7c). Przeciwnie, transfekcja dzikiego typu wektora ekspresyjnego NF-AT wykazała silny synergizm z HBx w aktywacji promotora COX-2. Nasze wyniki wskazują, że NF-AT, ale nie NF-kB, jest niezbędny do indukcji COX-2 przez HBx. Dyskusja Przerzuty do wątroby są główną przyczyną nawrotów HCC i złego rokowania po resekcji guza (1). Chociaż przewlekła infekcja wywołana przez HBV jest odpowiedzialna za rozwój większości HCC, specyficzna rola białek HBV w progresji HCC jest nieznana (1). W pracy tej po raz pierwszy dowiedzieliśmy, że HBx, często jedyne białko wirusowe ulegające ekspresji przez transformowane hepatocyty (2, 3), indukuje inwazję komórek, co sugeruje jej udział w metastatycznym rozprzestrzenianiu i nawrocie nowotworów wątroby. . Prezentujemy wyniki zarówno in vivo, jak i in vitro, które potwierdzają zdolność HBx do indukowania inwazji komórek nowotworowych. Test inwazji zarodka kurzego CAM pokazał, że HBx zwiększa zdolność komórek nowotworowych do degradowania ECM, przekraczania bariery śródbłonkowej i docierania do krwioobiegu. Ta regulacja zdolności przerzutowych komórek nowotworowych została potwierdzona przez testy inwazji Matrigel, w których komórki wykazujące ekspresję HBx również wykazywały zwiększony potencjał inwazyjny. Inwazja komórek nowotworowych wymaga degradacji błony podstawnej, składającej się głównie z kolagenu IV, w którym pośredniczą MMP-2 i MMP-9 (9). Większość MMP-2 stwierdzona w nowotworze wątroby jest wytwarzana przez komórki gwiaździste wątroby w otaczającym zrębie i jest wydzielana jako nieaktywny prekursor (11). Chociaż część aktywowanej MMP-2 można znaleźć w wątrobie zwłóknieniowej, najwyższa efektywność aktywacji MMP-2 znajduje się w tkankach nowotworowych (11) i koreluje z ekspresją MT1-MMP i rozprzestrzenianiem się nowotworu (9, 10). Pod tym względem MT1-MMP ulega nadmiernej ekspresji w wysoce inwazyjnych HCC (10), a aktywacja MMP-2 wiąże się z progresją guza i nawrotem u pacjentów z HCC (11). Co więcej, MT1-MMP może także aktywować inne MMP i bezpośrednio degradować składniki ECM i receptory błonowe (9, 26). Ta zdolność ma wyraźny wpływ na inwazyjność komórek niezależnie od przetwarzania MMP-2 (26, 27). Zatem indukcja ekspresji MT1-MMP przez HBx zapewnia komórce silne narzędzie inwazyjne, które przyczynia się do rozprzestrzeniania nowotworu i może odgrywać kluczową rolę w nawrocie HCC. NLPZ wykazują działanie przeciwnowotworowe w wielu nowotworach złośliwych, ze względu na ich zdolność do hamowania syntezy prostaglandyn przez COX-2 (13). Ekspresja tego enzymu jest wystarczająca do wywołania wzrostu guza i inwazji za pomocą różnych mechanizmów (13), z których niektóre są wspólne dla HBx (2). Pod tym względem COX-2 wzmaga migrację komórek, ekspresję MT1-MMP i aktywację MMP-2 (12). HBx jest również zdolny do indukowania ruchliwości komórek (17) i pokazujemy tutaj, że zwiększa on aktywację MMP-2 i ekspresję MT1-MMP. Zarówno inwazja zależna od COX-2a jak i migracja indukowana HBx są mediowane przez CD44 (17, 28), który jest odcinany przez MT1-MMP (26). Tak więc, poprzez regulację COX-2, MT1-MMP i CD44, HBx może aktywować złożony mechanizm, który ostatecznie doprowadzi do inwazji komórek. Komórki indukujące COX-2a indukują neounaczynienie przez regulację w górę różnych proangiogennych enzymów i czynników wzrostu, takich jak indukowalna syntaza tlenku azotu (iNOS), TGF-a i VEGF (29). Sam HBx indukuje ekspresję iNOS, TGF-a i VEGF i zaproponowano działanie angiogenne tego białka wirusowego (30, 31). Co więcej, ekspresja COX-2 powoduje zwiększoną odporność na apoptozę (13), inną właściwość dzieloną przez HBx w niektórych systemach (8)
[przypisy: mleko kokosowe właściwości, naturalne przyciemnianie włosów, karma dla owczarka niemieckiego ]
[patrz też: maxi3vena opinie, boję się jeździć samochodem, pekajace piety ]