Skip to content

Kwasowa proteoliza przez neutrofile: implikacje dla rozedmy płucnej w niedoborze a1-antytrypsyny cd

2 miesiące ago

270 words

Jednak PMN, które były kąpane w surowicy Pi Z generowały kwantowe zdarzenia proteolityczne, które były uderzająco większe niż te, które wystąpiły w obecności surowicy zawierającej wszystkie inne fenotypy AAT, które były testowane. Figura Kwasowe zdarzenia proteolityczne związane z PMN skąpane w surowicy od dawców z różnymi fenotypami AAT. PMN pozwolono na migrację przez 30 minut w 37 ° C na opsonizowanej fluoresceinowanej fibronektynie, podczas gdy kąpała się w surowicy od fenotypów za pomocą Pi M (a), Pi MZ (b), Pi SZ (c) i Pi Z (d). Komórki utrwalono, a następnie zbadano za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej z padającym światłem. Zauważmy dyskretne, zaokrąglone, ciemne obszary związane z migrującymi komórkami, które są bardzo zlokalizowanymi obszarami zdegradowanej fibronektyny (krótkie strzałki w identyfikacji wybranych obszarów proteolizy kwantowej). Należy również zwrócić uwagę na koalescencyjne obszary degradacji, które są związane z uwalnianiem 2 lub więcej granulek azurhilu. PMN pozostające na powierzchni są fluorescencyjne z powodu połknięcia fragmentów fibronektyny (szerokie strzałki). Kwantowe zdarzenia proteolityczne są podobnej wielkości wizualnie w CS. Należy również zauważyć, że związane z komórkami zdarzenia proteolityczne są uderzająco większe w komórkach skąpanych w surowicy Pi Z (długa strzałka w punkcie d) w porównaniu z komórkami skąpanymi w surowicy od innych dawców. Pasek skali: 10 .m. Następnie zmierzyliśmy kwantowe zdarzenia proteolityczne związane z PMN, stosując ilościową analizę obrazu. Kwantowe zdarzenia proteolityczne w Pi MS, Pi MZ i Pi SZ były tylko nieznacznie, ale znacznie większe (P <0,05) niż te w surowicy PiM. Jednak zdarzenia nie różniły się istotnie wielkością, gdy porównano różne grupy heterozygotyczne. Kwantowe zdarzenia proteolityczne, które zmierzono w surowicy od osób z niedoborem AAT (Pi Z) były znacząco i uderzająco (. 10-krotnie) większe niż w prawidłowej surowicy, jak również we wszystkich grupach heterozygotycznych (Figura 2; P <0,001). Figura 2 Rozmiar kwantowych procesów proteolitycznych PMN w surowicy od dawców mających różne fenotypy AAT. PMN inkubowano na fibronektynie, podczas gdy kąpano w surowicy od dawców mających różne fenotypy AAT, jak opisano na Figurze 1; następnie komórki utrwalono i zbadano za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej z padającym światłem. Obrazy zostały przechwycone, a kwantytyczne zdarzenia proteolityczne zmierzono przy użyciu oprogramowania MetaMorph. Należy zauważyć, że obszar kwantowych zdarzeń proteolitycznych związanych z PMN skąpanymi w surowicy Pi Z był prawie 10-krotnie większy niż w przypadku komórek skąpanych w surowicy od osobników Pi M, Pi MS, Pi MZ i Pi SZ. Zdarzenia były nieznaczne, ale istotnie większe, gdy komórki były kąpane w surowicy od heterozygot dla niedoboru AAT (Pi MS, Pi MZ i Pi SZ), w porównaniu z tymi w surowicy od osobników PiM. Dane przedstawiają średnią wielkości zdarzeń wśród różnych dawców mających te same fenotypy; słupki błędu reprezentują SEM. Liczbę dawców dla każdego fenotypu AAT wskazano powyżej każdego paska. * P <0,05 wobec Pi M. ** P <0,001 wobec wszystkich innych grup. Liczby zdarzeń mierzone w dawkach Pi M, Pi MS, Pi MZ, Pi SZ i Pi Z wynosiły odpowiednio 612, 349, 504, 245 i 348. Kiedy ocenialiśmy wielkość kwantowych zdarzeń proteolitycznych jako funkcję stężeń AAT w doświadczeniach zawierających surowicę od różnych dawców, występowała uderzająca odwrotna i nieliniowa zależność między obszarem zdarzenia a stężeniem AAT (Figura 3). Związek ten był wyraźnie krzywoliniowy z przegięciem poniżej 10 .m, tak że względnie małe zmniejszenie stężenia AAT występujące przy niskich stężeniach powoduje duży wzrost w obszarach zdarzeń, podczas gdy względnie duże wzrosty przy wyższych stężeniach AAT w surowicy powodują małe spadki w obszary kwantowych zdarzeń proteolitycznych. Figura 3 Rozmiary kwantowych zdarzeń proteolitycznych jako funkcja stężenia AAT w surowicy. Stężenia AAT w surowicy od dawców na Figurze 2 (Pi M, otwarte kółka, Pi MS, wypełnione trójkąty, Pi MZ, wypełnione kółka, Pi SZ, otwarte trójkąty i Pi Z, wypełnione kwadraty) zmierzono stosując automatyczny test immunologiczny fluorescencji. Stężenia AAT (oś pozioma) wykreślono względem wielkości związanych z PMN zjawisk proteolitycznych kwantowych (oś pionowa). Należy zauważyć, że przy stężeniach AAT mniejszych niż około 10. M, niewielkie zmiany w AAT w surowicy były związane z uderzającymi wzrostami wielkości kwantowych zdarzeń proteolitycznych, podczas gdy rozmiary zdarzeń zmieniały się minimalnie przy wyższych stężeniach AAT. Aby zapewnić, że zwiększony rozmiar kwantowych zdarzeń proteolitycznych związanych z PMN skąpaną w surowicy Pi Z można bezpośrednio przypisać niższemu stężeniu AAT w surowicy Pi Z, zmierzyliśmy kwantowe zdarzenia proteolityczne związane z komórkami skąpanymi w seryjnych rozcieńczeniach surowicy z Pi. M osobnik (początkowe stężenie AAT 41,6. M) [więcej w: joanna opozda wikipedia przyczyny, medicor gliwice, ciastka z wróżbą teksty ] [hasła pokrewne: joanna opozda wikipedia, medicor gliwice, nk w komórce ]