Skip to content

Potencjalne mechanizmy ekspansji ludzkich komórek NK w warunkach in vivo podczas leczenia niską dawką IL-2 ad 6

2 miesiące ago

773 words

Poniższe wykresy przedstawiają bezwzględną liczbę całkowitych jednojądrzastych komórek lub komórek CD56 + wytwarzanych przez kultury CD34 + HPC. Bezwzględne liczby komórek CD56 + uzyskano przez pomnożenie bezwzględnej liczby komórek zliczonych w błękicie trypanowym w procentach komórek CD56 + uzyskanych przez FACS. Dane są reprezentatywne dla sześciu oddzielnych eksperymentów. Dyskusja Zbadaliśmy potencjalny mechanizm, w którym ludzkie komórki NK selektywnie się rozszerzają podczas długotrwałych ciągłych infuzji in vivo niskiej dawki IL-2. Wcześniejsza praca wykazała, że podzbiór komórek NK CD56bright jest unikalny wśród limfocytów spoczynkowych w konstytutywnej ekspresji IL-2R o wysokim powinowactwie i jego szybkiej odpowiedzi proliferacyjnej na IL-2 w hodowli krótkoterminowej (3, 4). Jednak zakres proliferacji CD56bright powyżej 4 dni hodowli i charakterystyka ekspansji CD56bright in vivo nie został zgłoszony u pacjentów otrzymujących tę terapię. Dane przedstawione w tym raporcie pokazują, że odpowiedź komórek NK CD56bright na stężenia IL-2 pM jest niejednorodna. Ponad połowa tych świeżo wyizolowanych komórek ulega apoptozie w nieobecności proliferacji, pomimo obecności IL-2. Zatem spora część tych komórek musi być uważana za proliferacyjnie niereagującą na tę cytokinę. Odpowiedź proliferacyjna wywołana przez niską dawkę IL-2 obserwowana w pozostałych komórkach NK CD56bright była ograniczona, a następnie nastąpiło wyjście z cyklu komórkowego przy braku dodatkowej stymulacji. Chociaż istnieją dowody sugerujące, że proliferujące limfocyty są podatne na apoptozę (17, 20), przedstawione tu dane pokazują, że to komórki proliferujące zostały uratowane przed śmiercią komórkową. Przyczyna zatrzymania proliferacji nie jest jasna, ale nie wynikała ani z braku IL-2, ani z braku funkcjonalnego IL-2R .. W rzeczywistości, jeśli IL-2 była zneutralizowana lub jeśli zablokowano IL-2R o wysokim powinowactwie, większość komórek NK CD56bright stała się podatna na programowaną śmierć komórki w przedłużonej hodowli. Tak więc, ekspresja IL-2R o wysokim powinowactwie. był wymagany w obu procesach, tj. inicjowanie wzrostu i utrzymywanie późniejszego przeżycia, a funkcjonalne odpowiedzi na IL-2 zmieniały się w czasie. Stopniowa utrata proliferacji może obejmować komórki. niezdolność do uzupełnienia wewnątrzkomórkowych związków pośrednich krytycznych dla proliferacji indukowanej IL-2 (3 i / lub komórek. progresywne różnicowanie w obecności IL-2. W przeciwieństwie do proliferacji, przeżycie komórek NK można było utrzymać z IL-2 przez tygodnie. Konserwowana przez IL-2 błona jądrowa komórki NK i integralność funkcjonalna, o czym świadczy mierzalne wytwarzanie cytokin i aktywność cytotoksyczna po rozszerzonej hodowli in vitro. Jednak niskie stężenia IL-2 miały podobny wpływ na zapobieganie śmierci komórek T in vitro. Zatem opóźnienie w śledzeniu śmierci komórkowej obserwowane przez IL-2 (3 in vitro nie może samo w sobie odpowiadać selektywnej ekspansji in vivo komórek NK CD56bright podczas przedłużonej terapii IL-2. Limfocyty otrzymane od pięciu pacjentów otrzymujących przedłużoną ciągłą infuzję IL-2 badano pod kątem dowodów proliferacji. Komórki NK badane bezpośrednio bez hodowli in vitro nie wykazały zwiększonej frakcji w fazie G2 / M lub S cyklu komórkowego, w stosunku do komórek T uzyskanych w tym samym czasie od tych samych pacjentów. Komórki NK uzyskane od pacjentów przed leczeniem niską dawką IL-2 i od porównywalnych pacjentów nieotrzymujących IL-2 miały podobne profile cyklu komórkowego. Sugeruje to, że indukowana przez IL-2 (3 proliferacja komórek NK CD56bright nie jest odpowiedzialna za obserwowaną ekspansję in vivo. Chociaż nie możemy być pewni, że pewna proliferacja komórek NK może wystąpić podczas pierwszych 6 dni infuzji IL-2 in vivo, znacząca ekspansja komórek NK in vivo nie występuje aż do 4. 6 tygodni po rozpoczęciu IL-2 (5) . Brak wykrycia zwiększonej proliferacji komórek NK in vivo podczas terapii IL-2 pozostawia dwie inne hipotezy, aby uwzględnić zaobserwowaną zmianę w homeostazie komórek NK. Po pierwsze, egzogenne podawanie IL-2 może opóźnić śmierć komórek NK in vivo. Rzeczywiście, pacjenci. Komórki NK, które uległy ekspansji in vivo, można było utrzymywać in vitro za pomocą 100 pM IL-2 i 10% ludzkiej surowicy. Ten efekt wydaje się być wynikiem zdolności IL-2. Do zapobiegania apoptozie komórek NK. Jednak efekt ten można również zaobserwować w komórkach T, argumentując przeciwko temu jako jedynemu mechanizmowi odpowiedzialnemu za selektywną ekspansję komórek NK CD56bright. Zwiększone wytwarzanie komórek NK poprzez różnicowanie z prekursorami BM jest drugim, alternatywnym mechanizmem wyjaśniającym selektywną ekspansję komórek NK in vivo. Rzeczywiście, badania wykazały wcześniej, że względnie wysokie stężenia IL-2 mogą wspierać różnicowanie komórek NK z HPC CD34 + BM in vitro (21. 24)
[przypisy: gorące szesnastki, pharmaceris h stimupurin, epiduo żel cena ]
[przypisy: ksylazyna, epiduo żel cena, azotyny w moczu ]