Skip to content

Regeneracja niedokrwiennego mięśnia sercowego i śródbłonka naczyniowego przez dorosłe komórki macierzyste czesc 4

1 miesiąc ago

777 words

Obserwowaliśmy barwienie lacZ w strukturach naczyń o różnym kalibrze, ale najczęściej w naczyniach włosowatych. Komórki lacZ-dodatnie wiązały się z przeciwciałami Ab. Względem Flt-1 i ICAM-1 (Figura 3, e (ll), pokazując, że komórki SP lub ich potomstwo migrowały do uszkodzonego serca poprzez krążenie, zlokalizowane do nowo formujących się naczyń, i wydawało się, że zintegrował się z wyściółką powierzchniową jako zróżnicowane komórki śródbłonka. Obecnie trwają analizy włączenia komórek SP do określonych struktur naczyń (tj. Tętniczek, żył, naczyń limfatycznych). Kontynuujemy również badania nad względnym udziałem komórek SP w regeneracji określonych typów komórek naczyniowych (komórki śródbłonka, perycytu i mięśni gładkich). Nie znaleźliśmy komórek lacZ-dodatnich w strukturach naczyń zwierząt leczonych pozornie. Figura 3 Wprowadzanie komórek SP do naczyniowych komórek śródbłonka. (a (3d) zabarwioną X-galem część tkanki serca od osoby po przeszczepieniu przeszczepu komórek SP; b i d pokazują powiększenia wskazanych naczyń włosowatych od aib. (e. l) Tkanka serca jak powyżej, barwiona w celu ekspresji markerów śródbłonka. Powiększenie naczynia wybarwionego na obecność lacZ w e przedstawiono na f. To samo naczynie pokazano w g, wybarwiono Flt-1, a w h, ICAM-1. Powiększenie naczynia barwionego dla lacZ w i jest widoczne w j. To samo naczynie pokazano w k, wybarwiono dla Flt1, a w dla ICAM1. a, c, e i i: x 200; b, d, f. h i j. l: x 1,000. Zaobserwowaliśmy także włączenie komórek lacZ-dodatnich do mięśnia sercowego (ryc. 4). W przeciwieństwie do kontrolnej terapii pozorowanej, w której nie było żadnych dowodów na rekrutację komórek SP, tkankowa tkanka od leczonych myszy wykazywała niebieskie zabarwienie w całym sercu (Figura 4, c. H). Chociaż zakres barwienia różnił się znacznie, próbki tkanki mięśnia sercowego od wszystkich biorców przeszczepów były lacZ-dodatnie. W niektórych przypadkach, szczególnie u zwierząt 6, które miały nadzwyczajnie wysoki poziom dodatniości lacZ, barwienie rozszerzało się na duże odcinki (Figura 4, c. E). W wielu przypadkach wybarwienie miało punktowy wzór (Figura 4g). Mięsień sercowy z plamki pozytywnej kontroli Rosa26 ma zarówno punktowy, jak i rozproszony wzór (Figura 4b). Obszary pozytywne dla lacZ kosztowały ABa wobec p-aktyniny (Figura 4, e (h) i wydawały się przylegać do kardiomiocytów lacZ-ujemnych. Aby mieć pewność, że punktowy wzór barwienia nie wynika z infiltracji komórek krwiotwórczych, niektóre skrawki były obarczone Abs przeciwko CD45, antygenem wspólnym dla wszystkich jądrzastych komórek hematopoetycznych (18). Komórki lacZ-dodatnie na Figurze 4g nie były dodatnie dla CD45 (Figura 4i), chociaż sekrety CD45 jasno zabarwione śledziony w tych samych warunkach (Figura 4j). Tylko rzadko były inne plamy pozytywne dla lacZ dodatnie dla CD45 (nie pokazano). Figura 4 Wprowadzanie komórek SP do kardiomiocytów. (a) Kontrola negatywna: C57B1 / 6 tkanka sercowa wybarwiona na ekspresję lacZ. (b) Kontrola pozytywna: tkanka sercowa C57B1 / 6-Rosa26 barwiona dla ekspresji lacZ. Ta typowa sekcja demonstruje oba wzory barwienia punktowego i pełnego włókna. (c) Przekrój serca od biorcy przeszczepu z komórek SP, który otrzymał zawał. (d) Przekrój podłużny biorcy przeszczepu z komórek SP, który otrzymał zawał. (e. h) LacZ i . -actinin kosztem włókien lacZ-dodatnich. (i) Kosztowanie CD45 sekcji wg ih. (j) Barwienie anty-CD45 śledziony (kontrola dodatnia). Skrawki wybarwiono X-galem, a skrawki LacZ-dodatnie następnie wybarwiono dla (3 -actininy (f, h) i CD45 (i), i sekcje sfotografowano. Myocyty LacZ-dodatnie pojawiły się głównie na krawędzi blizn mięśnia sercowego, co odpowiada obszarowi opisanemu jako zagrożone. (15). Pokazano to na Figurze 5, gdzie miocyty lacZ-dodatnie można zobaczyć w 4-tygodniowym zawale mięśnia sercowego. W tej sekcji makrofag może być również widoczny w blizny poprzez kosztowanie (Figura 5b, otwarta strzałka), ale komórki lacZ-dodatnie (zamknięta grot strzałki) nie plamią. Po 4 tygodniach makrofagi powróciły do stosunkowo niskiej gęstości; zatem, barwienie lacZ obserwowane w miocytach nie jest wyjaśnione przez adhezyjne makrofagi. Figura 5d jest zawarta jako kontrola pozytywna dla wykazania, przy użyciu tego samego mAb, gęstości makrofagów zamrożonego odcinka mysiego serca po godzinie zgryzu i 3 godzinach reperfuzji. Figura 5 Barwienie lacZ występuje głównie na granicy zawału mięśnia sercowego. (a) Zdjęcie mocy mięśni dolnej (x 10) po zawale mięśnia sercowego po 4 tygodniach. Grot strzałki wskazuje położenie barwienia lacZ pokazanego w punktach b i c. Jaśniejsza różowa tkanka po lewej stronie i powyżej grotu strzały jest przede wszystkim włóknista i wynika z zawału
[patrz też: ciastka z wróżbą teksty, płatki drożdżowe przepisy, podsłuchane w biedrze ]
[przypisy: podsłuchane w biedrze, zaburzenie częściowe, immunosan ]