Skip to content

Selektywność kompetentnego pod względem replikacji adenowirusa dla ludzkich komórek raka sutka eksprymujących antygen MUC1 ad 6

1 tydzień ago

41 words

Wyniki wyrażono jako ułamkową objętość guza (V / V0). Różnice między grupami leczonymi MDA-MB-231 nie były znaczące. Guzy MCF-7 zakażone Ad.DF3-E1 / CMV-TNF były istotnie mniejsze w dniu 35 niż te leczone Ad.CMV-TNF (P <0,001) lub Ad.DF3-E1 / CMV-GFP (P <0,01 ). Dyskusja Prawie 80% pierwotnych ludzkich nowotworów sutka eksprymuje wysokie poziomy antygenu MUC1 (6). Inne badania wykazały, że guzy piersi u ludzi wyrażają gen MUC1 na poziomie mRNA i białka w około 30-krotnie większych ilościach niż w prawidłowej tkance piersiowej i łagodnych zmianach chorobowych (19). Te wyniki i demonstracja, że ekspresja MUC1 jest regulowana na poziomie transkrypcji w komórkach nowotworu sutka w hodowli (11), wspierają aktywację genu MUC1 w transformowanym nabłonku sutka. Chociaż badania ekspresji MUC1 w dużej mierze skupiały się na komórkach nowotworu sutka, inne prace wykazały, że MUC1 ulega nadmiernej ekspresji w różnych rakach, w tym jajnikach (8), prostacie (20), trzustce (21) i rakach płuc (22). Na podstawie tych ustaleń i biorąc pod uwagę możliwość identyfikacji elementów w promotorze MUC1, które są aktywowane w raku, sekwencje odpowiedzialne za transkrypcję MUC1 sklonowano z 5. region flankujący genu MUC1 (13). Późniejsze prace z wykorzystaniem wektorów retrowirusowych i adenowirusowych wykazały, że promotor MUC1 działa w kierunku selektywnej i wydajnej ekspresji heterologicznych genów w komórkach MUC1-dodatnich (14, 15). Doświadczenia in vivo z użyciem implantów nowotworu piersi u myszy nagich, którym wstrzyknięto Ad.DF3. Gal wykazano, że ekspresja. -Gal jest ograniczona do heteroprzeszczepów MUC1-dodatnich, głównie wzdłuż ścieżki igły (15). Ponadto, w modelu dootrzewnowych przerzutów raka sutka, leczenie Ad.DF3a HSV-tk i gancyklowirem (GCV) powodowało hamowanie wzrostu guza (15). Istotną przeszkodą w terapii genowej raka, nawet po bezpośrednim podaniu do guza, jest ograniczona dystrybucja wektora w obrębie masy guza. W celu zwiększenia wydajności transdukcji zbadano jednoczesne podawanie genów samobójczych z defektem replikacji z wirusem typu dzikiego (23, 24) lub z genami niezbędnymi do replikacji (25). Wprowadzono również bezpośrednie wstrzyknięcie komórek produkujących retrowirusy do guzów mózgu, aby uzyskać wektor wewnątrzmaciczny (26). Inne badania z delecją adenowirusa genu E1B wykazały selektywną replikację w komórkach nowotworowych zmutowanych w p53 i aktywność przeciwnowotworową (27. 30). Sprzeczne wyniki są jednak zgłaszane w odniesieniu do związku między replikacją wirusa z delecją E1B a statusem p53 (31. 33). Nasze badania wykorzystały kolejną strategię zwiększania wydajności transdukcji. Wyniki pokazują, że wstawienie promotora MUC1 powyżej genu E1A nadaje selektywną ekspresję tych białek w komórkach MUC1-dodatnich. Wyniki pokazują również, że wirus Ad.DF3-E1 indukuje selektywną lizę komórek nowotworowych, które eksprymują MUC1. Co ważne, kompetentny pod względem replikacji wirus Ad.DF3-E1 rozprzestrzenił się w całej masie guza, podczas gdy Ad.DF3. Gal uszkodzona pod względem replikacji była ograniczona do infekcji komórek wzdłuż ścieżki igły. Odkrycia te wskazują, że Ad.DF3-E1 i inne wektory zdolne do selektywnej replikacji w nowotworach mają potencjalnie większą skuteczność niż te osiągane z wirusami defektywnymi pod względem replikacji. Wprowadzanie promotora PSA do Ad5 w celu kierowania ekspresją E1A spowodowało powstanie wirusa znanego jako CN706, który jest kompetentny do replikacji w komórkach raka prostaty z dodatnim PSA (4). CN706 został dalej zmodyfikowany tak, aby obejmował ludzki promotor gruczołowej kalikreiny (hK2) w celu indukcji ekspresji genu E1B (34). Zastosowanie obu promotorów w wirusie CV764 spowodowało dalsze osłabienie wzrostu w nieprostowych komórkach rakowych (34). W naszym obecnym badaniu z Ad.DF3-E1, promotor MUC1 został użyty do kierowania ekspresją E1A. Replikacja Ad.DF3-E1 w komórkach MUC1-dodatnich była zwiększona o 5. 6 log ponad tę otrzymaną w komórkach ujemnych względem MUC1. Selektywność replikacji Ad.DF3-E1 w komórkach MUC1-dodatnich jest porównywalna z CV764 w komórkach prostaty (34). Badania in vivo z wirusem CN706 dodatkowo wykazały lizę heteroprzeszczepów nowotworowych PSA-dodatnich (4). Podobne wyniki dotyczące regresji nowotworu uzyskano w naszych aktualnych badaniach z ksenoprzeszczepami MCF-7 z AD.DF3-E1 i MUC1. Przeciwnie, wstrzyknięcie guzów MCF-7 wirusem defektywnym pod względem replikacji miało niewielki wpływ na wzrost guza. Ponadto wstrzyknięcie guzów MDA-ujemnych MUC-MB-231 za pomocą Ad.DF3-E1 miało niewielki wpływ na wzrost guza
[przypisy: mleko kokosowe właściwości, ciasteczka z wróżbą teksty śmieszne, ile kalorii spalamy podczas biegania ]
[hasła pokrewne: wyszukiwarka sanatorium nfz, naturalne przyciemnianie włosów, przychodnia pruszcz gdański ]