Skip to content

Złożona rola receptora progesteronowego w odpowiedzi na uszkodzenie naczyń ad 5

2 miesiące ago

208 words

Ponadto progesteron nie miał wpływu na proliferację VSMC zakażonych GFP (dane nie przedstawione). W przeciwieństwie do tego progesteron w sposób zależny od dawki hamował wzrost VSMC zainfekowanych PRB, pochodzących z PRKO, z największym skutkiem obserwowanym w moi 50 adeno-PRB (Figura 6a). Brak białka PR w komórkach pochodnych PRKO i ekspresja białka PR w komórkach zakażonych PRB (moi 50) została potwierdzona przez analizę Western blot (Figura 6a, wkładka). W celu dalszego zbadania roli PR w hamowaniu wzrostu VSMC za pośrednictwem progesteronu, zbadano wpływ antagonisty PR RU 486. Stosując mo- del adeno-PRB wynoszący 50, zależny od dawki progesteron hamował wychwyt tymidyny z maksymalnym hamowaniem 58%. 6% i IC50 = 11 nM; Figura 6b). Koinubulacja komórek traktowanych progesteronem antagonistą PR RU 486 doprowadziła do zależnego od dawki odwrócenia inhibicji wzrostu za pośrednictwem progesteronu (Figura 6b). Figura 5Progesteron hamuje proliferację hodowanych VSMC. Spoczynkowe aorty VSMC pochodzące od samic myszy PRKO lub ich myszy z miotu WT stymulowano 1% FBS w obecności lub nieobecności progesteronu, a ich szybkość proliferacji oceniano na podstawie wychwytu 3H-tymidyny. Leczenie progesteronem hamowało proliferację VSMC pochodzących z WT (zamknięte kółka), ale nie miało wpływu na proliferację VSMC pochodzących z PRKO (otwarte kółka) (* P <0,05, ** P <0,01 w porównaniu do komórek kontrolnych traktowanych samym nośnikiem). Pokazane są średnie. SE z trzech niezależnych eksperymentów, każdy wykonany z ośmioma powtórzeniami dla każdego stężenia progesteronu. Figura 6. Hamowanie kulturowych VSMC w pośredniczeniu progesteronem odbywa się za pośrednictwem PR. (a) VSMC pochodzące z PRKO były zakażone adeno-PRB w moi. s w zakresie od do 50, i badano wpływ progesteronu (Prog) na stymulowany FBS pobór 3H-tymidyny. Progesteron hamował proliferację VSMC z największym efektem w moi wynoszącym 50 dla adeno-PRB. (Moi = 1, czarne słupki, moi = 10, szare słupki i moi = 50, otwarte słupki; * P <0,01 vs. moi 1, ** P <0,001 vs. moi i P <0,01 vs. moi 10 ). Wstawka przedstawia analizę immunoblot demonstrującą ekspresję PRB w komórkach PRKO zakażonych adeno-PRB (moi = 50), podczas gdy nie obserwowano ekspresji w VKOMC zakażonych adeno-GFPa. Kontrola pozytywna (hBCa) została dostarczona przez producenta. (b) Po zakażeniu VSMC z pochodnych PRKO z moi wynoszącym 50 dla adeno-PRB, progesteron w sposób zależny od dawki hamował wzrost tych komórek, a zahamowanie wzrostu za pośrednictwem progesteronu zostało zniesione przez koinkubację z antagonistą PR RU 486 (* P < 0,01, ** P <0,001 względem komórek kontrolnych traktowanych samym nośnikiem). W aib symbol słupki oznaczają średnią. SE każdego z trzech niezależnych eksperymentów, każdy wykonany z ośmioma powtórzeniami na jeden stan. Dla każdego typu komórki, wyniki przedstawiono w odniesieniu do wychwytu 3H-tymidyny w komórkach traktowanych podłożem, ponieważ bezwzględna szybkość wychwytu była znacznie wyższa w komórkach pochodzących z PRKO w porównaniu z komórkami pochodnymi WT (porównaj Figura 4). Dyskusja Wyniki badań in vivo. Wyniki zarówno pomiarów uszkodzeń in vivo stosowanych w tych badaniach są zgodne ze sobą i wykazują wcześniej nierozpoznane funkcje PR w układzie sercowo-naczyniowym. Odpowiedź na uszkodzenie tętnicy szyjnej była znacznie większa u myszy PRKO niż u zwierząt WT, a progesteron pogarszał odpowiedź na uszkodzenie naczyniowe u myszy WT, ale nie miał znaczącego wpływu na uszkodzenie naczyń u myszy PRKO. Dane te potwierdzają złożoną rolę PR w odpowiedzi na uszkodzenia naczyń i biologii naczyń. Zgodnie z naszą wiedzą stanowi to pierwsze badanie, które bezpośrednio implikuje PR w odpowiedzi na uszkodzenie naczyń in vivo. Zwiększona odpowiedź na uszkodzenie naczyń u myszy PRKO jest prawdopodobnie wieloczynnikowa. Zwiększona proliferacja VSMC u samic myszy PRKO po uszkodzeniu naczyń sugeruje, że PR wywiera działanie antyproliferacyjne w VSMC in vivo u zwierząt WT. Jest to poparte dalej przez testy proliferacji VSMC in vitro pokazujące, że VSMC pochodzące od kobiet PRKO proliferują szybciej niż VSMC pochodzące z WT, nawet w SFM. Zatem utrata ekspresji PR i wynikający z tego wzrost proliferacji VSMC jest prawdopodobnie jednym mechanizmem, który przyczynia się do zwiększonej odpowiedzi na uszkodzenie naczyń u myszy PRKO. Co ciekawe, hiperproliferacyjny efekt przerwania PR obserwuje się przy braku progesteronu zarówno in vivo, jak i in vitro (patrz poniżej). Ważna rola PR w układzie sercowo-naczyniowym jest również poparta obserwacją, że indukowane progesteronem wzrosty w odpowiedzi na uszkodzenie naczyń są obserwowane w WT ale nie myszy PRKO. [podobne: czy da się cofnąć czas, wkładki higieniczne dla mężczyzn, kiedy szczepić na pneumokoki ] [więcej w: luxmed mehoffera, pulneo na kaszel, metaloproteinazy ]