Skip to content

Złożona rola receptora progesteronowego w odpowiedzi na uszkodzenie naczyń czesc 4

2 miesiące ago

23 words

Wzrost proliferacji VSMC spowodowany urazem był znacząco większy u myszy PRKO leczonych placebo niż u ich myszy z miotu WT (P <0,02). Uszkodzenie spowodowało również wzrost obszaru przyśrodkowego u myszy leczonych placebo, którym podawano placebo (20,6 . 1,0 × 10 <3 mm2, P <0,02 vs. nieuszkodzony), oraz u myszy PRKO traktowanych placebo (24,1 × 1,4 × 10. 3 mm2 ; P <0,001 vs. nieuszkodzony). Podobnie jak w przypadku znakowania BrdU, zwiększenie obszaru przyśrodkowego myszy PRKO leczonych placebo było również znacznie większe niż obserwowane u myszy z miotową traktowanymi placebo, którym podawano placebo (p <0,01). Tak więc, przy braku endogennego lub egzogennego progesteronu, zakłócenie ekspresji PR spowodowało wzrost obu miar odpowiedzi na uszkodzenie naczyń. Progesteron wzmaga reakcję na uszkodzenia naczyń w WT, ale nie na samice PRKO. Wyznakowane BrdU VSMC w środkach masowego przekazu i intima myszy WT wzrosły z 23. 4 komórki BrdU-dodatnie na sekcję zwierząt leczonych placebo do 40. 6 komórek BrdU-dodatnich na sekcję w grupie leczonej progesteronem (P <0,05). Jednakże u myszy PRKO znaczące znakowanie BrdU widoczne u myszy PRKO traktowanych placebo (42. 8 komórek BrdU-dodatnich na sekcję) miało tendencję do zmniejszania się przez leczenie progesteronem (32. 7 komórek znakowanych BrdU na sekcję), ale ten trend nie osiągnął istotności statystycznej (P = 0,4). U myszy WT wzrost obszaru przyśrodkowego po urazie był również większy w przypadku leczenia progesteronem (23,3 1.2 1,2 10 3 3 mm2 u myszy leczonych progesteronem vs. 20,6 1.0 1,0 × 10 3 3 mm2 u myszy leczonych placebo; 0,01). Przeciwnie, u myszy PRKO leczonych placebo duży wzrost obszaru przyśrodkowego po urazie (24,1. 1,4 x 10. 3 mm2) był nieco osłabiony przez traktowanie progesteronem (21,4. 1,3 x 10. 3 mm2), chociaż ten trend nie był istotne statystycznie (P = 0,13). Dane te wykazują, że progesteron niekorzystnie wpływa na odpowiedź z uszkodzeniem naczyń u zwierząt z WT, ale nie zmienia znacząco już i tak silnej odpowiedzi na uszkodzenie naczyń u myszy PRKO. VSMC hodowane z myszy PRKO są hiperproliferujące. Aby określić, czy wzrost proliferacji VSMC obserwowany in vivo u myszy PRKO był wynikiem wewnętrznej zmiany w VSMC, przeprowadzono serię testów proliferacji VSMC in vitro. VSMC hodowane z aserae myszy WT u myszy i trzymane w SFM pozostawało w spokoju przez 24. 48 godzin zgodnie z oczekiwaniami (Figura 4). Przeciwnie, VSMC pochodzące od samic myszy PRKO kontynuowały proliferację przez cały dzień (10.0. 1,6. Krotnie większy niż VSMCs pochodzący z WT) i dzień 2 (13,1. 1,8. Krotnie większy niż VSMCs pochodzący z WT) eksperymentu (Figura 4; n = 5 oddzielnych eksperymentów, P <0,0001 vs. WT dla każdego dnia), pomimo utrzymywania w SFM. Równolegle przeprowadzono badania kontrolne z użyciem VSMC pochodzących od samców zwierząt, zarówno komórki pochodzące z WT, jak i z komórek PRKO pozostały w stanie spoczynku w tych samych warunkach bez surowicy (dane nie pokazane). Figura 4VSMC pochodzące od samic myszy PRKO są hiperproliferujące. VSMCs aorty pochodzące od samic myszy PRKO lub ich myszy z miotu WT utrzymywano w SFM i ich szybkość proliferacji oceniano na podstawie wychwytu 3H-tymidyny. W przeciwieństwie do komórek pochodzących z WT, komórki pochodzące z PRKO nie uległy spoczynkowi, ale raczej kontynuowały znacznie proliferację przez co najmniej 48 godzin (pobór 3H-tymidyny 10,1. 1,6-krotny i 13,1. 1,8. -Krotnie większy w PRKO vs. WT komórki odpowiednio w dniu i dniu n, n = 5 niezależnych doświadczeń, * P <0,001 wobec WT dla każdego dnia). Progesteron hamuje proliferację kulturowych VSMC w sposób zależny od PR. Wpływ progesteronu na indukowaną przez FBS proliferację izolowanych, hodowanych VSMC zbadano następnie. Spoczynkowe VSMC hodowane z myszy WT lub PRKO stymulowano 1% FBS w obecności lub nieobecności progesteronu. Progesteron znacząco hamował indukowany przez FBS wzrost VSMCs pochodzących z WT w sposób zależny od dawki (Figura 5, maksymalne hamowanie 54%. 3%, IC50 = 34 nM), ale nie miał znaczącego wpływu na proliferację w VSMCs pochodzących z PRKO (Figura 5). W celu zbadania roli PR w pośredniczeniu w antyproliferacyjnym działaniu progesteronu, VSMC pochodzące z PRKO zakażono różnymi stężeniami adenowirusa kodującego ekspresję pełnej długości ludzkiego WT PRB. Immunobarwienie PR przy użyciu swoistego dla PR przeciwciała wykazało, że ponad 95% VSMC zostało skutecznie zakażonych przy moi 50 (dane nie przedstawione). W przypadku braku progesteronu zakażenie adeno-PRB lub kontrolnym adenowirusem kodującym GFP nie miało znaczącego wpływu na wzrost VSMC (dane nie pokazane) [patrz też: pytania do zlotych mysli, czy da się cofnąć czas, mediq legionowo cennik ] [hasła pokrewne: pekajace piety, mediq legionowo cennik, pytania do złotych myśli ]